PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)的簡(jiǎn)稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達(dá)納米級(jí)別。
PCR實(shí)驗(yàn)室可分為試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物檢測(cè)區(qū)四個(gè)區(qū)域,這四個(gè)區(qū)域在物理空間上必須*相互獨(dú)立,各區(qū)域無(wú)論是在空間上還是在使用中,應(yīng)當(dāng)始終處于*的分隔狀態(tài),不能有空氣的直接相通。
所以,臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向應(yīng)按:試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物檢測(cè)區(qū),應(yīng)時(shí)刻防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前區(qū)域??砂凑丈鲜鲰樞騾^(qū)域空氣壓力遞減的方式進(jìn)行,也可通過(guò)安裝排風(fēng)扇、負(fù)壓排風(fēng)裝置或其他可行方式實(shí)現(xiàn)。
臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境清潔:《臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》中有對(duì)物表清潔、消毒的要求,不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染。
基本原則:由清潔區(qū)向污染區(qū)進(jìn)行,潔具不可交叉。
清潔消毒方向:準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物檢測(cè)區(qū)
清潔消毒范圍:工作區(qū)域的物體表面(含桌、椅),可使用含氯消毒劑擦拭消毒,空氣和工作臺(tái)面可使用紫外線照射消毒,也可使用空間消毒器進(jìn)行全環(huán)節(jié)消毒。
不可使用紫外線消毒器及化學(xué)消毒進(jìn)行有人狀態(tài)下的消毒。
PCR室內(nèi)的消毒應(yīng)防止揚(yáng)塵(減少人員走動(dòng))、殺滅DNA或RNA的基因片段??蛇x擇懸掛紫外線燈管進(jìn)行空氣消毒,試驗(yàn)前照射30-60分鐘,實(shí)驗(yàn)結(jié)束照射30-60分鐘,必要時(shí)延長(zhǎng)照射時(shí)間(可照射一夜)。
終末消毒:當(dāng)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染時(shí),應(yīng)按要求立即撤出相關(guān)人員,在無(wú)人情況下可使用化學(xué)消毒劑進(jìn)行終末消毒,如熏蒸法:過(guò)氧乙酸1g/m⊃3;加熱熏蒸(濕度70-90%),密閉24小時(shí);氣溶膠噴霧:3%過(guò)氧化氫:20mL/m⊃3;氣溶膠噴霧;5%過(guò)氧乙酸2.5mL/m⊃3;氣溶膠噴霧(濕度20-40%)。